Fluorescence measurements - Misure di fluorescenza
 

Le misure di fluorescenza sono richieste in molti applicazioni biomediche (fluorescence diagnosis of malignancies) biologiche (chlorophyll and carotenoid) ed ambientali.

Le misure di fluorescenza hanno bisogno tipicamente di un setup ad alta sensibilità. Per la maggior parte delle applicazioni di fluorescenza la quantità di energia di fluorescenza emessa è soltanto 3% della quantità di energia della luce di eccitazione. La luce di fluorescenza è a energia più bassa (più alta in lunghezza d'onda) che l'energia di eccitazione ed è solitamente luce scatterata (emette l'energia in tutte le direzioni).

La più importante considerazione per la messa a punto è di impedire che la luce di eccitazione entri nello spettrometro. Ciò può essere fatta con differenti metodi, dove uno non esclude l'altro:

1. Utilizzare una fonte di luce AvaLight-LED per l'eccitazione (piccola larghezza di banda), non emettente energia alla lunghezza d'onda di fluorescenza.

2. Utilizzare un filtro di interferenza passa basso o passa alto congiuntamente ad una fonte di luce di AvaLight-HAL per avere una alta emissione con piccola banda di eccitazione

3. Assicurarsi che il percorso ottico per la luce di eccitazione e la fluorescenza siano perpendicolari 90 gradi. In Questo modo la luce di eccitazione non entrerà nella fibra di raccolta (uso del CUV-UV/VIS-FL o del CUV-DA)

4. Utilizzare il tempo di decadimento della fluorescenza di separare l'energia di eccitazione dall'impulso di inizio di tempo di integrazione. Per questo è richiesta una fonte di luce pulsata ((pulsed laser or XE-2000 Xenon flash) e un AvaSpec-2048FT, spettrometro con ritardo programmabile.

Un tipico setup per le misure di fluorescenza è dato qui sotto:

Components used in the irradiance measurement setup are depicted in the following table:

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